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- 一文解析細(xì)胞破碎的三種方法
- 更新日期：2021-12-13 瀏覽次數(shù)：4670
細(xì)胞破碎，細(xì)胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁，使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù)。細(xì)胞破碎分離提純某一種蛋白質(zhì)時(shí)，首先要把蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài)，不喪失活性。所以要采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M織和細(xì)胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細(xì)胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動(dòng)物臟器的細(xì)胞膜較脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有較堅(jiān)固的纖維素、半纖維素組成的細(xì)胞壁。
下面小編簡單解析一下細(xì)胞破碎的三種方法，如下所示：
(1)酸堿處理：調(diào)節(jié)pH值，改變蛋白質(zhì)的荷電性質(zhì)，提高產(chǎn)物的溶解度。
(2)化學(xué)試劑處理：用表面活性劑或有機(jī)溶劑(甲苯)處理細(xì)胞，增大細(xì)胞壁的通透性，降低胞內(nèi)產(chǎn)物的相互作用，使之容易釋放。
(3)酶菌溶：利用溶解細(xì)胞壁的酶處理菌體細(xì)胞，使細(xì)胞壁受到部分或*破壞后，再利用滲透壓沖擊等方法破壞細(xì)胞膜，進(jìn)一步增大胞內(nèi)產(chǎn)物的通透性。 酶溶的優(yōu)點(diǎn)：操作溫和，選擇性強(qiáng)，酶能快速地破壞細(xì)胞壁，而不影響細(xì)胞內(nèi)含物的質(zhì)量，但缺點(diǎn)是酶的費(fèi)用高，因而限制了它在大規(guī)模生產(chǎn)中的應(yīng)用。
(4)化學(xué)滲透法與機(jī)械破碎法相比：速度低，效率差，且化學(xué)或生化試劑的添加形成新的污染，給進(jìn)一步的分離純化增添麻煩。但化學(xué)滲透法選擇性高，胞內(nèi)產(chǎn)物的總釋放率低，可有效抑制核酸的釋放，料液粘度小，有利于后處理。